生物学国际权威期刊《基因与发育》(Genes & Development)于2011年4月21日在线发表了上海交通大学农业与生物学院植物明升体育app研究所杨洪全教授团队最新研究成果:依赖于蓝光的CRY1与SPA1相互作用突显了动态的光信号转导机理。
光是最重要的环境因子之一,它不仅是植物光合作用的能量来源,同时也是植物生长发育的信号来源。植物通过内在感应光的信号分子——光受体介导的信号转导途径来调控植物的生长发育。在模式植物拟南芥中至少存在3 类光受体:蓝光受体隐花色素 (CRY) 、蓝光受体向光素(PHOT),以及红光/远红光受体光敏色素(PHY)。其中蓝光受体CRY是重要的光受体,在植物中调控光形态建成、开花时间、生物节律性、气孔开放和气孔发育等重要生理过程。此外,CRY在动物中也参与调控生物节律性。
拟南芥蓝光受体CRY(包含CRY1和CRY2)信号转导机理涉及与一个含有锌指结构域的E3泛素连接酶——COP1的直接蛋白相互作用。其作用的后果是,抑制COP1的活性,使其底物HY5(转录因子)发生积累,从而促进光形态建成。但到目前为止,除了COP1之外,尚不清楚在CRY1信号转导途径中是否还存在其它直接相互作用的下游信号转导因子,以及CRY1信号转导是否涉及依赖于蓝光的生化机理。该研究通过酵母双杂交系统,发现拟南芥CRY1和CRY2都与SPA1发生依赖于蓝光的直接蛋白相互作用:在黑暗条件下CRY1和CRY2与SPA1不能发生相互作用,而蓝光照射促进它们的相互作用,并且随着蓝光照射强度的增加或照射时间的延长而增强;体内蛋白质共定位分析表明,CRY1和CRY2与SPA1在拟南芥原生质体和洋葱表皮细胞核内均发生共定位;免疫共沉淀分析(Co-IP)表明,在拟南芥中CRY1与SPA1只能在蓝光照射条件下发生相互作用,而在黑暗处理、红光和远红光照射条件下它们均不能发生相互作用。这种蓝光诱导的CRY1——SPA1相互作用是一个十分灵敏的过程,短至30秒的蓝光处理即可导致明显的相互作用,并且随着蓝光照射强度的增加或照射时间的延长而增强;以前的研究表明,SPA家族有4个成员:SPA1、SPA2、SPA3和SPA4。它们都是光形态建成的负调控因子,通过共同作用促进COP1的活性。SPA1 SPA2 SPA3 SPA4四突变体与COP1具有相似的组成型光形态建成的表型。该研究构建了CRY1 SPA1 SPA2 SPA3 SPA4五突变体,以及CRY2 SPA1 SPA2 SPA3和CRY2 SPA1 SPA3 SPA4四突变体,并通过遗传关系分析,发现SPA1、SPA2、SPA3和SPA4在遗传上位于CRY1和CRY2的下游调控光形态建成、气孔发育和光周期开花时间;酵母三杂交系统和植物体内免疫共沉淀分析表明,蓝光诱导的CRY1——SPA1相互作用导致COP1与SPA1的结合受到抑制,从而促进COP1——SPA1复合体的解离。这一系列由蓝光诱导的生化过程的后果是,导致COP1的活性下降,其底物HY5蛋白的稳定性增强而发生积累,最终促进光形态建成。因此,由蓝光诱导的CRY1与SPA1的相互作用及其由此导致的COP1——SPA1复合体的解离突显了CRY1信号转导的动态特征。
杨洪全教授研究团队的助理研究员连红莉博士为该论文的第一作者,该研究得到了国家自然明升体育app基金委、农业部和上海市科委的经费支持。(来源:上海交通大学)
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